概述

E-Poly™ Transfection Reagent是一款性能(néng)優良的核酸轉染試劑，适用(yòng)于多(duō)種細胞的各類DNA、siRNA的高效轉染，如HEK293T、HepG2、U87、Hepa1-6、MC38等。具(jù)有(yǒu)操作(zuò)簡便、轉染效率高、細胞毒性小(xiǎo)、重複性好等優勢，該試劑轉染效果不受血清和抗生素存在的影響，配制的轉染複合物(wù)可(kě)以直接加入完全培養基中(zhōng)，轉染前無需更換無血清培養基。

産(chǎn)品介紹

極簡操作(zuò)流程

根據實驗需要按順序混合配制轉染複合液：DNA（RNA）溶液（1mg/mL）、Reagent A、Reagent B溶液推薦體(tǐ)積比為(wèi)1:50:3各組分(fēn)混勻後，室溫孵育20 min後，進行細胞給藥。

詳實研究數據

1. 多(duō)種細胞内綠色熒光蛋白（GFP）質(zhì)粒轉染效率

根據實驗需要接種細胞過夜，在轉染24~48 h後通過熒光顯微鏡觀察GFP表達，根據熒光顯微鏡下看到的熒光蛋白表達量判斷DNA轉染效率。結果顯示，E-Poly™轉染試劑在多(duō)種細胞中(zhōng)GFP轉染效率顯著高于T品牌3000（T-3000）、T品牌2000（T-2000）。

圖1.多(duō)種細胞内質(zhì)粒轉染效率及綠色熒光蛋白表達量

2. E-Poly™遞送siRNA進行基因敲低

根據實驗需要接種細胞過夜，換液後加入siGAPDH轉染複合液，轉染24 h後測定GAPDH和β-Actin的mRNA表達水平。結果顯示，E-Poly™在HEK293T和HepG2細胞上siRNA敲低效率較T-3000更優，但E-Poly™和T-3000的siRNA敲低效率顯著低于CALNP™ RNAi in vitro（貨号：DN001-10，下面同）轉染試劑。

圖2.多(duō)種轉染試劑轉染siRNA基因敲減效率比較

3. E-Poly™共轉質(zhì)粒及siRNA

根據實驗需要接種細胞，E-Poly™、T-3000和T-2000組同時反向轉染Fluc-質(zhì)粒及siRNA，24 h後加入熒光素底物(wù)測定熒光水平；E-Poly™+CALNP™組采用(yòng)E-Poly™轉染質(zhì)粒6 h後，換液加入siRNA-CALNP™轉染複合液，轉染24 h後加入熒光素底物(wù)測定熒光水平。結果顯示，E-Poly™在HEK293T和HepG2細胞上轉染Fluc-質(zhì)粒蛋白表達效率顯著高于T-3000和T-2000，共轉siRNA後敲低效率略優于T-3000，顯著優于T-2000組；而E-Poly™+CALNP™聯用(yòng)組siRNA用(yòng)量更低（siRNA：70 nM vs.10 nM），但Fluc基因敲減效率更優。

注：T-2000、T-3000及E-Poly™組，si-Fluc-RNA濃度為(wèi)70 nM；E-Poly™+CALNP™組，si-Fluc-RNA濃度為(wèi)10 nM

圖3.多(duō)種轉染試劑共轉質(zhì)粒DNA和siRNA過表達和基因敲減比較